人P物质ELISA试剂盒的操作方法主要包括以下几个步骤：

1. 准备阶段：确保所有实验材料如酶标仪、高精度加样器及枪头、洗涤液等已准备好。将试剂盒从冷藏环境中取出，在室温下平衡15-30分钟后方可使用。

2. 样本处理：根据样本类型（如血清、血浆、组织匀浆等）进行相应的处理。例如，血清样本需室温自然凝固后离心分离；组织样本则需切割、称重、匀浆并离心收集上清液。

3. 加样：在酶标包被板上设置标准品孔和样本孔，按照说明书要求加入不同浓度的标准品和待测样本。注意加样时应避免触及孔壁，轻轻晃动混匀。

4. 孵育与洗涤：用封板膜封板后，将酶标板置于37℃温育一定时间（具体时间根据说明书确定）。孵育结束后，小心揭掉封板膜，弃去液体，用洗涤液反复洗涤5次，确保彻底去除未结合的成分。

5. 显色与测定：向每孔加入显色剂A和B，轻轻震荡混匀后避光显色。显色结束后，加入终止液终止反应，并在规定时间内（如15分钟内）用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值）。

6. 结果计算：根据标准品的浓度和OD值绘制标准曲线，通过样品的OD值在标准曲线上查找对应的浓度，再乘以稀释倍数得到样品的实际浓度。

请注意，以上步骤仅为一般性描述，具体操作时应严格遵循试剂盒说明书上的详细步骤和注意事项。