活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit，也称ROS Assay Kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平[1, 2]。
本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup，以便于活性氧的检测。Rosup是一种混合物(compound mixture),浓度为50mg/ml。使用本试剂盒检测细胞内活性氧的效果请参考图1。
图1. 碧云天活性氧检测试剂盒(S0033)检测L929 (小鼠成纤维细胞)细胞内活性氧的效果图。L929细胞装载DCFH-DA探针后用50μg/ml Rosup处理30分钟，随后PBS洗涤一次后用荧光显微镜(图A)检测。正常的L929细胞中探针几乎未被氧化成荧光化合物，细胞中的绿色荧光非常弱；使用活性氧阳性对照试剂Rosup处理使细胞内活性氧生成大幅增加，DCFH-DA与活性氧反应，细胞中的绿色荧光显著增强。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。

本试剂盒S0033M包装可以测定500-2500个样品。

保存条件：
-20℃保存，一年有效。

注意事项：
探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
探针装载完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的装载情况是否良好。DCF的激发光谱和发射光谱请参考下页图谱。
尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(刺激时间除外)，以减少各种可能的误差。
荧光酶标仪检测时须使用适合荧光检测的黑板或白板，推荐使用碧云天BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(FCP966)或BeyoGold™黑色透明底96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP965)。

本产品仅用于专业人员的科学研究，不得用于临床诊断或zhiliao，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。